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干酪乳桿菌葉酸測(cè)定用培養(yǎng)基原理及測(cè)定菌種介紹

更新時(shí)間:2020-12-09  |  點(diǎn)擊率:641
   干酪乳桿菌葉酸測(cè)定用培養(yǎng)基采用干酪乳桿菌(ATCC7469)為測(cè)定用菌,用于葉酸的微生物法測(cè)定。它是基于Flynn等人(1)的配方,并經(jīng)Baker等人(2)和Waters、Mollin(3)改良。用于維生素測(cè)定的測(cè)定菌通常需要三種培養(yǎng)基:維持培養(yǎng)基、接種培養(yǎng)基和測(cè)定用培養(yǎng)基。
  葉酸的檢測(cè)方法有許多種,主要根據(jù)測(cè)定試樣來(lái)決定其測(cè)定方法。若測(cè)定葉酸藥劑或制品中的葉酸含量,通??刹捎酶邏阂合嗌V法、比色法、熒光分析法、紫外分光光度法以及薄層層析法等。若測(cè)定食品或植物中的游離葉酸,一般都采用微生物測(cè)定法。
  常用的檢測(cè)葉酸的干酪乳桿菌葉酸測(cè)定用培養(yǎng)基菌株有鼠李糖乳桿菌ATCC7469、糞鏈球菌以前被稱為ATCC8043、啤酒小球菌ATCC8081。此3種微生物對(duì)不同形式葉酸的敏感度不同。糞鏈球菌只對(duì)非甲基化葉酸敏感,如葉酸(PteGlu)、二氫葉酸(DHF)和四氫葉酸(THF),可用于鑒別分析各種形式葉酸在不同檢測(cè)物中的分布。啤酒小球菌對(duì)甲基化葉酸也不敏感。鼠李糖乳桿菌對(duì)單谷氨酸葉酸、含2或3個(gè)谷氨酸葉酸及其還原型衍生物均敏感,是3種微生物中反應(yīng)譜帶寬的一種,也是常用的菌種。
  各種微生物生長(zhǎng)需要有一些微量的專一生長(zhǎng)因子,它們可能是維生素或氨基酸等。根據(jù)這種需求性為基礎(chǔ),設(shè)計(jì)出各種生長(zhǎng)因子的定量法,選擇那些以必需定量的營(yíng)養(yǎng)物為必需生長(zhǎng)因子的菌株,制備好*不含該營(yíng)養(yǎng)物的定量培養(yǎng)基,再分別在干酪乳桿菌葉酸測(cè)定用培養(yǎng)基上加入標(biāo)準(zhǔn)營(yíng)養(yǎng)物和待測(cè)樣品,并定量地接種菌株進(jìn)行培養(yǎng)。然后根據(jù)微生物生長(zhǎng)隨營(yíng)養(yǎng)物加入量的不同而變化的情況,就可以對(duì)樣品中的營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)行定量。定量的方法有比濁法、酸度滴定法(試管法)、瓊脂平板擴(kuò)散法和質(zhì)量法等。
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